Javascript imezimwa kwa sasa kwenye kivinjari chako. Baadhi ya vipengele vya tovuti hii havitafanya kazi wakati javascript imezimwa.
Jisajili na maelezo yako mahususi na dawa maalum ya kuvutia na tutalinganisha taarifa unayotoa na makala katika hifadhidata yetu pana na kukutumia nakala ya PDF mara moja.
Chembe za Ban-Lan-Gen hupunguza ugonjwa sugu wa kolitis unaosababishwa na dextran sodiamu salfeti kwa panya kwa kurekebisha vijidudu vya utumbo na kurejesha uzalishaji wa SCFA Derived-GLP-1 ya utumbo.
Jiao Peng,1-3,*Li Xi,4,*Zheng Lin,3,5 Duan Lifang,1 Gao Zhengxian,2,5 Diehu,1 Li Jie,6 Li Xiaofeng,6 Shen Xiangchun,5 Xiao Haitao21 Hospitali ya Shenzhen ya Chuo Kikuu cha Peking Idara ya Dawa, Shenzhen, Jamhuri ya Watu wa China; 2 Kituo cha Sayansi ya Afya cha Chuo Kikuu cha Shenzhen Shule ya Famasia, Shenzhen, Jamhuri ya Watu wa China; 3 Kituo cha Utafiti wa Teknolojia ya Uhandisi cha Chuo Kikuu cha Tiba cha Guizhou cha Tiba ya Kikabila na Maendeleo na Matumizi ya Tiba ya Jadi ya Kichina Wizara ya Elimu, Maabara Muhimu ya Famasia ya Mkoa wa Guizhou, Chuo Kikuu cha Tiba cha Guizhou, Guiyang, Jamhuri ya Watu wa China; 4 Idara ya Gastroenterology, Hospitali ya Shenzhen ya Chuo Kikuu cha Peking, Shenzhen, Jamhuri ya Watu wa China; 5 Shule ya Famasia, Chuo Kikuu cha Tiba cha Guizhou, Maabara Muhimu ya Jimbo ya Kazi na Matumizi ya Mimea ya Dawa, Guiyang; 6 Idara ya Tiba ya Maabara, Hospitali ya Shenzhen ya Chuo Kikuu cha Peking, Shenzhen, Uchina [email protected] Shen Xiangchun, Shule ya Famasia, Chuo Kikuu cha Tiba cha Guizhou, Guizhou, Jamhuri ya Watu wa Uchina, 550004, Barua pepe [email protected] Lengo: Tiba inayotokana na GLP-1 ni chaguo jipya la matibabu kwa ugonjwa wa utumbo mpana. Chembe za Ban-Lan-Gen (BLG) ni uundaji unaojulikana wa TCM ya kuzuia virusi unaoonyesha shughuli zinazoweza kupambana na uchochezi katika matibabu ya hali mbalimbali za uchochezi. Hata hivyo, athari yake ya kupambana na uchochezi kwenye ugonjwa wa kolitis na utaratibu wake wa utendaji bado haujaeleweka. NJIA: Kuanzisha ugonjwa sugu wa kolitis unaosababishwa na dextran sodium sulfate (DSS) katika panya. Viashiria vya shughuli za ugonjwa, alama za histolojia za jeraha, na viwango vya saitokini zinazosababisha uchochezi vilifanywa ili kutathmini athari ya kinga ya BLG. Athari za BLG kwenye microbiota ya utumbo na utumbo zilibainishwa na viwango vya GLP-1 kwenye seramu na usemi wa Gcg ya utumbo mpana, GPR41, na GRP43, muundo wa microbiota ya utumbo, kinyesi Viwango vya SCFA, na kutolewa kwa GLP-1 kutoka kwa seli za epithelial za koloni za panya zinazotokana na SCFA. Matokeo: Matibabu ya BLG yalipunguza kwa kiasi kikubwa upotevu wa uzito wa mwili, DAI, kufupisha utumbo mpana, uharibifu wa tishu za koloni, na viwango vya saitokini zinazosababisha uvimbe vya TNF-α, IL-1β, na IL-6 katika tishu za koloni. Zaidi ya hayo, matibabu ya BLG yanaweza kurejesha kwa kiasi kikubwa usemi wa Gcg, GPR41 na GRP43 na viwango vya GLP-1 katika seramu ya panya wa ugonjwa wa kolitis, na kwa kuongeza bakteria zinazozalisha SCFA kama vile Akkermansia na Prevotellaceae_UCG-001, na kupunguza wingi wa bakteria kama vile Eubacterium_xylanophilum_group, Ruminococcaceae_UCG-014, Intestinimonas na Oscillibacter. Zaidi ya hayo, matibabu ya BLG yanaweza kuongeza kwa kiasi kikubwa kiwango cha SCFA katika kinyesi cha panya wa ugonjwa wa kolitis. Wakati huo huo, majaribio ya ndani ya vitro pia yalionyesha kuwa dondoo la kinyesi cha panya waliotibiwa na BLG linaweza kuchochea sana seli ndogo za msingi za epithelial za Murine colonic hutoa GLP-1. Hitimisho: Matokeo haya yanaonyesha kuwa BLG ina athari ya kupambana na ugonjwa wa kolitis. BLG ina uwezo wa kutengenezwa kama tiba, angalau kwa sehemu kwa kurekebisha microbiota ya utumbo na kurejesha uzalishaji wa GLP-1 inayotokana na SCFA ya utumbo. Dawa zinazoahidi kwa ugonjwa wa kolitis sugu unaorudia. Maneno muhimu: kolitis, chembechembe za Ban-Lan-Gen, microbiota ya utumbo, asidi ya mafuta ya mnyororo mfupi, GLP-1
Ugonjwa wa kolitis ya vidonda (UC) ni ugonjwa wa uchochezi wa muda mrefu wa utumbo mpana na rektamu unaojulikana na kuhara mara kwa mara, maumivu ya tumbo, kupunguza uzito, na kinyesi chenye damu kwenye mucopurulent.1 Hivi karibuni, kuenea kwa UC kumekuwa kukiongezeka katika nchi ambazo hapo awali zilikuwa na matukio machache, ikiwa ni pamoja na Uchina, huku umaarufu wa mitindo ya maisha ya Magharibi ukiongezeka.2 Ongezeko hili linaleta matatizo makubwa kwa afya ya umma na lina athari kubwa kwa uwezo wa wagonjwa kufanya kazi na ubora wa maisha. Ikumbukwe kwamba chanzo cha UC bado hakijafahamika wazi, lakini kwa ujumla inakubaliwa kwamba kijenetiki, vipengele vya mazingira, vijidudu vya utumbo, na mfumo wa kinga vyote vinachangia ukuaji wa UC.3 Hata sasa, hakuna tiba ya UC, na lengo la matibabu ni kudhibiti dalili za kliniki, kusababisha na kudumisha msamaha, kukuza uponyaji wa utando wa mucous, na kupunguza kujirudia. Matibabu ya kitamaduni ni pamoja na aminosalicylates, corticosteroids, dawa za kukandamiza kinga, na biolojia.Hata hivyo, dawa hizi haziwezi kufikia athari inayotarajiwa kutokana na madhara yake mbalimbali.4 Hivi karibuni, tafiti nyingi za kesi zimeonyesha kuwa dawa za jadi za Kichina (TCM) zimeonyesha uwezo mkubwa katika kusaidia kupunguza UC yenye sumu kidogo, ikidokeza kwamba maendeleo ya tiba mpya za TCM ni mkakati wa matibabu unaoahidi kwa UC.5-7​​
Chembechembe za Banlangen (BLG) ni dawa ya kitamaduni ya Kichina iliyotengenezwa kutokana na dondoo la maji la mzizi wa Banlangen.8 Mbali na ufanisi wake wa kuzuia virusi, BLG inaonyesha shughuli inayoweza kuzuia uvimbe katika matibabu ya hali mbalimbali za uchochezi.9,10 Kwa kuongezea, glucosinolates (R,S-goitrin, progoitrin, epiprorubin na glucoside zimetengwa na kutambuliwa kutoka kwa dondoo za maji za Radix isatidis) na nucleosides (hypoxanthine, adenosine, uridine na guanosine) na alkaloidi za indigo kama vile indigo na indirubin.11,12 Uchunguzi uliopita umeonyesha vyema kwamba misombo ya adenosine, uridine na indirubin inaonyesha athari kubwa za kupambana na colitis katika mifano tofauti ya wanyama ya colitis.13-17 Hata hivyo, hakuna tafiti zinazotegemea ushahidi zilizofanywa ili kutathmini ufanisi wa BLG katika colitis. Katika utafiti huu, tulichunguza athari ya kinga ya BLG kwenye colitis sugu inayorudiarudia inayosababishwa na dextran sodium sulfate (DSS) katika Panya wa C57BL/6 na kugundua kuwa ulaji wa mdomo wa BLG ulipunguza kwa kiasi kikubwa utumbo mpana unaorudiarudia unaosababishwa na DSS kwa panya. Kuvimba, mifumo yake ya udhibiti inahusishwa na urekebishaji wa vijidudu vya utumbo na urejesho wa uzalishaji wa peptidi-1 inayofanana na glukagoni (GLP-1) inayotokana na utumbo.
Chembe za BLG (zisizo na sukari, Z11020357 iliyoidhinishwa na NMPA; Beijing Tongrentang Technology Development Co., Ltd., Beijing, China; nambari ya kundi: 20110966) zilinunuliwa kutoka kwa maduka ya dawa. DSS (Uzito wa Masi: Daltons 36,000–50,000) ilinunuliwa kutoka MP Biologicals (Santa Ana, Marekani). Sulfasalazine (SASP) (≥ 98% usafi), hematoxylin na eosini zilinunuliwa kutoka Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, Marekani). Vifaa vya kupima luminex Elisa vya panya TNF-α, IL-1β na IL-6 vilinunuliwa kutoka kwa mifumo ya utafiti na maendeleo (Minneapolis, MN, Marekani). Asidi asetiki, asidi ya propioni, na asidi ya butiriki zilinunuliwa kutoka Aladdin Industries (Shanghai, China). Asidi ya ethylbutiriki 2 ilinunuliwa kutoka Merck KGaA (Darmstadt, Ujerumani).
Panya dume wa C57BL/6 wenye umri wa wiki 6-8 (uzito wa mwili ni gramu 18-22) walinunuliwa kutoka Beijing Wetahe Laboratory Animal Technology Co., Ltd. (Beijing, China) na kuwekwa katika mazingira ya 22 ± 2 °C kwa mzunguko wa mwanga/giza wa saa 12. Panya walilishwa lishe ya kawaida ya panya yenye upatikanaji wa maji ya kunywa kwa wiki moja ili kuzoea mazingira mapya. Kisha panya waligawanywa bila mpangilio katika vikundi vinne: kundi la kudhibiti, kundi la modeli ya DSS, kundi la kutibiwa na SASP (200 mg/kg, kwa mdomo) na kundi la kutibiwa na BLG (1 g/kg, kwa mdomo). Kama inavyoonyeshwa kwenye Mchoro 1A, kulingana na utafiti wetu uliopita, ugonjwa sugu wa kolitisi unaorudiarudia ulisababishwa kwa panya kwa mizunguko mitatu ya 1.8% DSS kwa siku 5, ikifuatiwa na maji yaliyosafishwa kwa siku 7, kulingana na utafiti wetu uliopita.18 Panya katika vikundi vilivyotibiwa na SASP na BLG walitibiwa na SASP na BLG, mtawalia, kila siku kuanzia siku ya 0. Kulingana na majaribio ya awali, kipimo cha BLG kiliwekwa kwa 1 g/kg. Wakati huo huo, kipimo cha SASP kiliwekwa kwa 200 mg/Kg kulingana na machapisho.4 Vikundi vya modeli za udhibiti na DSS vilipokea kiasi sawa cha maji katika jaribio lote.
Mchoro 1 BLG huboresha ugonjwa sugu wa kolitis unaorudiarudia unaosababishwa na DSS kwa panya.(A) Ubunifu wa majaribio wa ugonjwa sugu wa kolitis unaorudiarudia na matibabu, (B) mabadiliko ya uzito wa mwili, (C) alama ya faharisi ya shughuli za ugonjwa (DAI), (D) urefu wa utumbo mpana, (E) picha inayowakilisha utumbo mpana, (F) Madoa ya H&E Utumbo mpana (ukuzaji, ×100) na (G) alama ya histolojia. Data zinawasilishwa kama wastani ± SEM (n = 6).##p < 0.01 au ###p < 0.001 dhidi ya kundi la udhibiti (Con); *p < 0.05 au **p < 0.01 au ***p < 0.001 dhidi ya kundi la DSS.
Uzito wa mwili, uthabiti wa kinyesi, na kutokwa na damu kwenye rektamu zilirekodiwa kila siku. Kielezo cha shughuli za ugonjwa (DAI) kilibainishwa kwa kuchanganya alama za uzito wa mwili, uthabiti wa kinyesi, na kutokwa na damu kwenye rektamu kama ilivyoelezwa hapo awali.19 Mwishoni mwa jaribio, panya wote waliuawa na damu, kinyesi na utumbo mpana vilikusanywa kwa ajili ya majaribio zaidi.
Tishu za utumbo mpana zilirekebishwa rasmi na kupachikwa kwenye mafuta ya taa. Sehemu za mikroni 5 zilitengenezwa na kupakwa rangi ya hematoksilini-eosini (H&E), kisha zikapofushwa na kupigwa alama kama ilivyoelezwa hapo awali.19
Jumla ya RNA ya tishu za utumbo mpana ilitolewa kwa kutumia kitendanishi cha Trizol (Invitrogen, Carlsbad, CA), ikifuatiwa na uchimbaji wa cDNA kwa kutumia reverse transcriptase (TaKaRa, Kusatsu, Shiga, Japani). PCR ya kiasi ilifanywa kwa kutumia mfumo wa PCR wa wakati halisi kwa kutumia SYBR Green Master (Roche, Basel, Uswisi). Nakala za jeni lengwa zilirekebishwa kuwa β-actin na data ilichambuliwa kwa kutumia mbinu ya 2-ΔΔCT. Mfuatano wa utangulizi wa jeni umeonyeshwa katika Jedwali 1.
Kutengwa na kukuzwa kwa seli za epithelial za koloni ya panya kulifanywa kama ilivyoelezwa hapo awali.20 Kwa kifupi, koloni za panya wenye umri wa wiki 6-8 ziliondolewa kwanza baada ya kuharibiwa na kutengana kwa seviksi, kisha kufunguliwa kwa urefu, na kutibiwa na Hanks Balanced Salt Solution (HBSS, bila kalsiamu na magnesiamu) na kukatwa vipande vidogo vya 0.5-1 mm. Baadaye, tishu zilimeng'enywa na 0.4 mg/mL collagenase XI (Sigma, Poole, UK) katika sehemu ya kati ya DMEM huru na kuzungushwa kwa 300 xg kwa dakika 5 kwenye joto la kawaida. Rudisha kidonge katika sehemu ya kati ya DMEM (iliyoongezwa na seramu ya ng'ombe ya fetasi ya 10%, Units 100/mL penicillin, na 100 µg/mL streptomycin) kwa 37 °C na kupita kwenye wavu wa nailoni (ukubwa wa vinyweleo ~250 µm). Vipimo vya seli za epithelial za koloni viliwekwa kwenye vyombo vya chini ya glasi na kufunikwa na asidi asetiki, asidi ya propionic, asidi butiriki, na dondoo za kinyesi cha panya kwa saa 2 kwa joto la 37°C, 5% CO2.
Tishu za utumbo mpana zilibadilishwa kuwa sawa na PBS, na viwango vya saitokini IL-6, TNF-α na IL-1β katika tishu za utumbo mpana viligunduliwa kwa kutumia vifaa vya majaribio vya luminex ELISA (mifumo ya Utafiti na Maendeleo, Minneapolis, MN, Marekani). Vile vile, viwango vya GLP-1 katika seramu na njia ya utamaduni wa seli za epithelial za utumbo mpana ziliamuliwa kwa kutumia vifaa vya ELISA (Bioswamp, Wuhan, China) kulingana na maagizo ya mtengenezaji.
Jumla ya DNA kutoka kwenye kinyesi ilitolewa kwa kutumia kifaa cha kutoa DNA (Tiangen, China). Ubora na wingi wa DNA ulipimwa kwa uwiano wa 260 nm/280 nm na 260 nm/230 nm, mtawalia. Baadaye, kwa kutumia kila DNA iliyotolewa kama kiolezo, vitangulizi maalum 338F (ACTCCTACGGGAGGCAGCAG) na 806R (GGACTACHVGGGTWTCTAAT) vilitumika kukuza maeneo ya V3-V4 ya jeni la 16S rRNA katika maeneo tofauti. Bidhaa za PCR zilisafishwa kwa kutumia Kifaa cha Kuondoa Gel cha QIAquick (QIAGEN, Ujerumani), kilichopimwa kwa PCR ya wakati halisi, na kupangwa kwa kutumia jukwaa la mpangilio wa IlluminaMiseq PE300 (Illumina Inc., CA, Marekani). Kwa uchanganuzi wa bioinformatiki, usindikaji wa data ulifanyika kufuatia itifaki zilizoripotiwa hapo awali.21,22 Kwa kifupi, tumia Cutadapt (V1.9.1) kuchuja faili mbichi za haraka. OTU ziliunganishwa kwa kutumia UPARSE (toleo la 7.0.1001) yenye mkataa wa kufanana wa 97%, na UCHIME ilitumika kuondoa mfuatano wa chimeriki. Uchambuzi wa muundo wa jamii na uainishaji ulifanywa kwa kutumia kiainishaji cha RDP (http://rdp.cme.msu.edu/) kulingana na hifadhidata ya jeni la SILVA ribosomal RNA.
Viwango vya asidi ya mafuta yenye mnyororo mfupi (asidi asetiki, asidi ya propioni, na asidi ya butiriki) vilipimwa kama ilivyoelezwa hapo awali na Tao et al., pamoja na marekebisho kadhaa.23 Kwa kifupi, miligramu 100 za kinyesi ziliwekwa kwanza katika mililita 0.4 za maji yaliyoondolewa ioni, ikifuatiwa na mililita 0.1 za asidi ya sulfuriki 50% na mililita 0.5 za asidi ya ethylbutiriki 2 (kiwango cha ndani), kisha zikabadilishwa na kuwa homogenized na kupashwa joto kwa 4°C. Sentifuji kwa kasi ya 12,000 rpm kwa dakika 15 kwa C. Supernatant ilitolewa kwa kutumia 0.5 mL ya etha na kuingizwa kwenye GC kwa ajili ya uchambuzi. Kwa uchambuzi wa kromatografia ya gesi (GC), sampuli zilichambuliwa kwa kutumia kromatografia ya gesi ya GC-2010 Plus (Shimadzu, Inc.) iliyo na kigunduzi cha ioni ya moto (FID). Mgawanyiko ulipatikana kwa kutumia safu wima ya ZKAT-624, 30 m × 0.53 mm × 0.3 μm (Lanzhou Zhongke Antai Analytical Technology Co., Ltd., China). Data zilipatikana kwa kutumia programu ya suluhisho la GC (Shimadzu, Inc.). Uwiano wa mgawanyiko ulikuwa 10:1, gesi ya kubeba ilikuwa nitrojeni, na kiwango cha mtiririko kilikuwa 6 mL/dakika. Kiasi cha sindano kilikuwa 1 μL. Joto la sindano na kigunduzi lilikuwa 300°C. Joto la oveni lilishikiliwa kwa 140°C kwa dakika 13.5, kisha likaongezeka hadi 250°C kwa kiwango cha 120°C/dakika; halijoto ilihifadhiwa kwa dakika 5.
Data huwasilishwa kama wastani ± kosa la kawaida la wastani (SEM). Umuhimu wa data ulipimwa kwa kutumia ANOVA ya njia moja ikifuatiwa na jaribio la masafa mengi la Duncan. Programu ya GraphPad Prism 5.0 (GraphPad Software Inc., San Diego, CA, Marekani) ilitumika kwa hesabu zote na p < 0.05 ilizingatiwa kuwa muhimu kitakwimu.
Inajulikana sana kwamba UC ni ugonjwa sugu wa kolitis unaorudiarudia unaoambatana na maumivu makali ya tumbo, kuhara na kutokwa na damu. Kwa hivyo, kolitis sugu inayorudiarudia inayosababishwa na DSS kwa panya ilianzishwa ili kutathmini ufanisi wa BLG dhidi ya kolitis (Mchoro 1A). Ikilinganishwa na kundi la udhibiti, panya katika kundi la modeli ya DSS walikuwa na uzito mdogo wa mwili na DAI ya juu, na mabadiliko haya yalibadilishwa kwa kiasi kikubwa baada ya siku 24 za matibabu ya BLG (Mchoro 1B na C). Kufupisha utumbo mpana ni sifa muhimu ya UC. Kama inavyoonyeshwa katika Michoro 1D na E, urefu wa utumbo mpana wa panya waliopokea DSS ulifupishwa kwa kiasi kikubwa, lakini walipunguzwa na matibabu ya BLG. Baadaye, uchambuzi wa histopatholojia ulifanywa ili kutathmini uvimbe wa utumbo mpana. Picha zilizotiwa rangi na alama za patholojia za H&E zilionyesha kuwa utawala wa DSS ulivuruga kwa kiasi kikubwa usanifu wa utumbo mpana na kusababisha uharibifu wa crypt, ilhali matibabu ya BLG yalipunguza kwa kiasi kikubwa uharibifu wa crypt na alama za patholojia (Mchoro 1F na G). Ikumbukwe kwamba, athari ya kinga ya BLG kwa kipimo cha 1 g/Kg ilikuwa sawa na ile ya SASP kwa kipimo cha 200 mg/Kg. Kwa pamoja, matokeo haya yanaonyesha kwamba BLG ina ufanisi katika kupunguza ukali wa ugonjwa sugu wa kolitis unaosababishwa na DSS kwa panya.
TNF-α, IL-1β na IL-6 ni alama muhimu za uchochezi wa uvimbe wa utumbo mpana. Kama inavyoonyeshwa kwenye Mchoro 2A, DSS ilisababisha ongezeko kubwa la usemi wa jeni wa TNF-α, IL-1β na IL-6 kwenye utumbo mpana ikilinganishwa na kundi la udhibiti. Utawala wa BLG unaweza kubadilisha mabadiliko haya yanayosababishwa na DSS kwa kiasi kikubwa. Kisha, tulitumia ELISA kubaini viwango vya saitokini za uchochezi TNF-α, IL-1β, na IL-6 kwenye tishu za utumbo mpana. Matokeo pia yalionyesha kuwa viwango vya TNF-α, IL-1β, na IL-6 kwenye utumbo mpana viliongezeka kwa kiasi kikubwa kwa panya waliotibiwa na DSS, ilhali matibabu ya BLG yalipunguza ongezeko hili (Mchoro 2B).
Mchoro 2 BLG huzuia usemi wa jeni na uzalishaji wa saitokini zinazosababisha uvimbe TNF-α, IL-1β na IL-6 katika utumbo mpana wa panya waliotibiwa na DSS.(A) Usemi wa jeni la koloni la TNF-α, IL-1β na IL-6; (B) viwango vya protini ya koloni vya TNF-α, IL-1β na IL-6. Data zinawasilishwa kama wastani ± SEM (n = 4–6).#p < 0.05 au ##p < 0.01 au ###p < 0.001 dhidi ya kundi la udhibiti (Con); *p < 0.05 au **p < 0.01 dhidi ya kundi la DSS.
Dysbiosis ya utumbo ni muhimu katika pathogenesis ya UC.24 Ili kuchunguza kama BLG hurekebisha microbiota ya utumbo ya panya waliotibiwa na DSS, mpangilio wa 16S rRNA ulifanywa ili kuchambua jamii ya bakteria ya yaliyomo kwenye utumbo. Mchoro wa Venn unaonyesha kwamba vikundi hivyo vitatu vinashiriki OTU 385. Wakati huo huo, kila kundi lilikuwa na OTU za kipekee (Mchoro 3A). Zaidi ya hayo, faharisi ya Chao1 na faharisi ya Shannon iliyoonyeshwa kwenye Mchoro 3B na C ilionyesha kuwa utofauti wa jamii wa microbiota ya utumbo ulipunguzwa kwa panya waliotibiwa na BLG, kwani faharisi ya Shannon ilipungua sana katika kundi lililotibiwa na BLG. Uchambuzi wa vipengele vikuu (PCA) na uchambuzi mkuu wa uratibu (PCoA) zilitumika kubaini mifumo ya makundi miongoni mwa vikundi hivyo vitatu na zilionyesha kuwa muundo wa jamii wa panya waliotibiwa na DSS ulitenganishwa wazi baada ya matibabu ya BLG (Mchoro 3D na E). Data hizi zinaonyesha kuwa matibabu ya BLG yaliathiri pakubwa muundo wa jamii wa panya walio na ugonjwa wa kolitis unaosababishwa na DSS.
Mchoro 3 BLG hubadilisha utofauti wa vijidudu vya utumbo katika panya walio na ugonjwa wa kolitis unaosababishwa na DSS.(A) Mchoro wa Venn wa OTU, (B) Kielezo cha Chao1, (C) Kielezo cha utajiri cha Shannon, (D) Mchoro wa alama ya Uchambuzi wa Vipengele Vikuu (PCA) wa OTU, (E) Alama ya Uchambuzi wa Uratibu wa Viungo Vikuu (PCoA) wa OTU Mchoro. Data imewasilishwa kama wastani ± SEM (n = 6).**p < 0.01 dhidi ya kundi la DSS.
Ili kutathmini mabadiliko maalum katika vijidudu vya kinyesi, tulichambua muundo wa vijidudu vya utumbo katika viwango vyote vya taksonomia. Kama inavyoonyeshwa kwenye Mchoro 4A, phyla kuu katika vikundi vyote ilikuwa Firmicutes na Bacteroidetes, ikifuatiwa na Verrucomicrobia. Wingi wa uwiano wa Firmicutes na Firmicutes/Bacteroidetes uliongezeka kwa kiasi kikubwa katika jamii za vijidudu vya kinyesi vya panya waliotibiwa na DSS ikilinganishwa na panya wa kudhibiti, na mabadiliko haya yalibadilishwa kwa kiasi kikubwa baada ya matibabu ya BLG. Hasa, matibabu ya BLG yaliongeza kwa kiasi kikubwa wingi wa Verrucobacterium kwenye kinyesi cha panya walio na ugonjwa wa kolitis unaosababishwa na DSS. Katika ngazi ya kaya, jamii za vijidudu vya kinyesi zilikaliwa na Lachnospiriaceae, Muribaculaceae, Akkermansiaceae, Ruminococcaceae na Prevotellaceae (Mchoro 4B). Ikilinganishwa na kundi la DSS, kupungua kwa BLG kuliongeza wingi wa Akkermansiaceae, lakini kulipunguza wingi wa Lachnospiraceae na Ruminococcaceae. Hasa, katika jenasi. Kiwango cha chini, microbiota ya kinyesi ilichukuliwa na Lachnospira_NK4A136_group, Akkermansia na Prevotellaceae_UCG-001 (Mchoro 4C). Matokeo haya pia yalionyesha kuwa matibabu ya BLG yalibadilisha kwa ufanisi usawa wa microbiota katika kukabiliana na changamoto ya DSS, iliyoonyeshwa na kupungua kwa Eubacterium_xylanophilum_group, Ruminococcaceae_UCG-014, Intestinimonas na Oscillibacter, na ongezeko la Akkermansia na Prevotellaceae_UCG-001.
Mchoro 4 BLG hubadilisha wingi wa vijidudu vya utumbo katika panya wa kolitisi inayosababishwa na DSS.(A) Wingi wa vijidudu vya utumbo katika kiwango cha phylum; (B) Wingi wa vijidudu vya utumbo katika kiwango cha familia; (C) Wingi wa vijidudu vya utumbo katika kiwango cha jenasi. Data zinawasilishwa kama wastani ± SEM (n = 6).#p < 0.05 au ###p < 0.001 dhidi ya kundi la udhibiti (Con); *p < 0.05 au **p < 0.01 au ***p < 0.001 dhidi ya kundi la DSS.
Kwa kuzingatia kwamba asidi ya mafuta yenye mnyororo mfupi (SCFAs) ndiyo metaboliti kuu za Akkermansia na Prevotellaceae_UCG-001, huku asetati, propionate na butyrate zikiwa SCFA nyingi zaidi kwenye lumen ya utumbo, 25-27 bado tuko kwenye utafiti wetu. Kama inavyoonyeshwa kwenye Mchoro 5, viwango vya asetati ya kinyesi, propionate, na butyrate vilipunguzwa sana katika kundi lililotibiwa na DSS, huku matibabu ya BLG yakiweza kukandamiza upunguzaji huu kwa kiasi kikubwa.
Mchoro 5. BLG huongeza viwango vya SCFA kwenye kinyesi cha panya walio na ugonjwa wa kolitis unaosababishwa na DSS.(A) Kiwango cha asidi asetiki kwenye kinyesi; (B) kiwango cha asidi ya propioni kwenye kinyesi; (C) kiwango cha asidi ya butiriki kwenye kinyesi. Data zinawasilishwa kama wastani ± SEM (n = 6).#p < 0.05 au ##p < 0.01 dhidi ya kundi la udhibiti (Con); *p < 0.05 au **p < 0.01 dhidi ya kundi la DSS.
Tulihesabu zaidi mgawo wa uwiano wa Pearson kati ya tofauti ya kiwango cha jenasi SCFA na microbiota ya kinyesi. Kama inavyoonyeshwa kwenye Mchoro 6, Akkermansia ilihusiana vyema na uzalishaji wa asidi ya propionic (Pearson = 0.4866) na asidi ya butyric (Pearson = 0.6192). Kwa upande mwingine, Enteromonas na Oscillobacter zote zilihusishwa vibaya na uzalishaji wa asetati, zikiwa na mgawo wa Pearson wa 0.4709 na 0.5104, mtawalia. Vile vile, Ruminococcaceae_UCG-014 ilihusiana vibaya na uzalishaji wa asidi ya propionic (Pearson = 0.4508) na asidi ya butyric (Pearson = 0.5842), mtawalia.
Mchoro 6 Uchambuzi wa uwiano wa Pearson kati ya SCFA tofauti na vijidudu vya koloni.(A) Enteromonas zenye asidi asetiki; (B) Bacillus ya mtikiso na asidi asetiki; (C) Akkermansia dhidi ya asidi ya propionic; (D) Ruminococcus_UCG-014 yenye asidi ya propionic; (E) Akkermansia yenye asidi ya butyriki; (F) ) Ruminococcus _UCG-014 yenye asidi ya butyriki.
Peptidi-1 inayofanana na Glucagon (GLP-1) ni bidhaa maalum ya baada ya kutafsiriwa ya proglucagon (Gcg) yenye sifa za kuzuia uchochezi.28 Kama inavyoonyeshwa kwenye Mchoro 7, DSS ilisababisha kupungua kwa kiasi kikubwa kwa usemi wa Gcg mRNA. Matibabu ya koloni na BLG yanaweza kubadilisha kwa kiasi kikubwa upunguzaji wa Gcg unaosababishwa na DSS ikilinganishwa na kundi la udhibiti (Mchoro 7A). Wakati huo huo, kiwango cha GLP-1 katika seramu kilipunguzwa kwa kiasi kikubwa katika kundi lililotibiwa na DSS, na matibabu ya BLG yanaweza kuzuia kwa kiasi kikubwa upunguzaji huu (Mchoro 7B). Kwa kuwa asidi za mafuta zenye mnyororo mfupi zinaweza kuchochea usiri wa GLP-1 kupitia uanzishaji wa kipokezi kilichounganishwa na G-protini 43 (GRP43) na kipokezi kilichounganishwa na G-protini 41 (GRP41), pia tulichunguza GPR41 na GRP43 katika utumbo mpana wa ugonjwa wa kolitis na kugundua kuwa usemi wa mRNA wa koloni wa GRP43 na GPR41 ulipungua kwa kiasi kikubwa baada ya changamoto ya DSS, na matibabu ya BLG yanaweza kuokoa kwa ufanisi upunguzaji huu (Mchoro 7C na D).
Mchoro 7 BLG huongeza viwango vya GLP-1 kwenye seramu na usemi wa mRNA wa Gcg, GPR41 na GRP43 kwenye koloni katika panya waliotibiwa na DSS.(A) Usemi wa mRNA wa Gcg kwenye tishu za koloni; (B) Kiwango cha GLP-1 kwenye seramu; (C) Usemi wa mRNA wa GPR41 kwenye tishu za koloni; (D) Usemi wa mRNA wa GPR43 kwenye tishu za koloni. Data zinawasilishwa kama wastani ± SEM (n = 5–6).#p < 0.05 au ##p < 0.01 dhidi ya kundi la udhibiti (Con); *p < 0.05 dhidi ya kundi la DSS.
Kwa kuwa matibabu ya BLG yanaweza kuongeza viwango vya GLP-1 katika seramu, usemi wa mRNA ya Gcg ya koloni, na viwango vya SCFA vya kinyesi katika panya waliotibiwa na DSS, tulichunguza zaidi acetate, propionate, na butyrate pamoja na kutoka kwa panya waliotibiwa na udhibiti (F-Con), ugonjwa wa kolitis ya DSS (F-Con) -DSS) na ugonjwa wa kolitis iliyotibiwa na BLG (F-BLG) wakati wa kutolewa kwa GLP-1 kutoka kwa seli za epithelial za msingi za kolic za kolic. Kama inavyoonyeshwa kwenye Mchoro 8A, seli za epithelial za msingi za kolic za panya zilizotibiwa na asidi asetiki ya 2 mM, asidi ya propionic, na asidi ya butyric, mtawalia, zilichochea kwa kiasi kikubwa kutolewa kwa GLP-1, sambamba na tafiti zilizopita.29,30 Vile vile, F-Con, F-DSS, na F-BLG zote (sawa na 0.25 g ya kinyesi) zilichochea sana kutolewa kwa GLP-1 kutoka kwa seli za epithelial za msingi za kolic za kolic za kolic. Ikumbukwe kwamba, kiasi cha GLP-1 kilichotolewa na seli za epithelial za msingi za kolic za panya zilizotibiwa na F-DSS kilikuwa chini sana kuliko kile. ya seli za epithelial za koloni za panya zilizotibiwa na F-Con na F-BLG. (Mchoro 8B). Data hizi zinaonyesha kwamba matibabu ya BLG yalirejesha kwa kiasi kikubwa uzalishaji wa GLP-1 unaotokana na SCFA kwenye utumbo.
Mchoro 8 SCFA inayotokana na BLG huchochea kutolewa kwa GLP-1 kutoka kwa seli za epithelial za msingi za koroni za koroni.(A) Asidi asetiki, asidi ya propioni, na asidi ya butiriki zilichochea kutolewa kwa GLP-1 kutoka kwa seli za epithelial za koroni za msingi za koroni; (B) dondoo za kinyesi F-Con, F-DSS na F-BLG seli za epithelial za koroni za msingi zilizochochea Kiasi cha GLP-1 iliyotolewa. Vipimo vya seli za epithelial za koroni ziliwekwa kwenye sahani za petri zilizo chini ya glasi na kutibiwa na asidi asetiki ya 2 mM, asidi ya propioni, asidi ya butiriki, na dondoo za kinyesi F-Con, F-DSS, na F-BLG (sawa na kinyesi cha 0.25 g), mtawalia. Saa 2 kwa 37°C, 5% CO2, mtawalia. Kiasi cha GLP-1 kilichotolewa kutoka kwa seli za epithelial za koloni za panya kiligunduliwa na ELISA. Data zinawasilishwa kama wastani ± SEM (n = 3).#p < 0.05 au ##p < 0.01 dhidi ya tupu au F-Con; *p < 0.05 dhidi ya F-DSS.
Vifupisho: Ace, asidi asetiki; Pro, asidi ya propioniki; hata hivyo, asidi butiriki; F-Con, dondoo la kinyesi kutoka kwa panya wa kudhibiti; F-DSS, dondoo la kinyesi kutoka kwa panya wa ugonjwa wa kolitis; F-BLG, kutoka kwa utumbo mpana uliotibiwa na BLG. Dondoo la kinyesi kutoka kwa panya wa uchochezi.
Ikiwa imeorodheshwa na Shirika la Afya Duniani kama ugonjwa usioweza kurekebishwa, UC inazidi kuwa hatari duniani kote; hata hivyo, mbinu bora za kutabiri, kuzuia, na kutibu ugonjwa huo bado ni chache. Kwa hivyo, kuna haja ya haraka ya kuchunguza na kutengeneza mikakati mipya salama na madhubuti ya matibabu kwa UC. Maandalizi ya dawa za jadi za Kichina ni chaguo linaloahidi kwa sababu maandalizi mengi ya dawa za jadi za Kichina yameonyeshwa kuwa na ufanisi katika matibabu ya UC kwa idadi ya watu wa China kwa karne nyingi, na yote ni viumbe hai vya kibiolojia na vifaa vya asili ambavyo havina madhara kwa wanadamu na wanyama.31,32 Utafiti huu ulilenga kutafuta maandalizi salama na madhubuti ya dawa za jadi za Kichina kwa ajili ya matibabu ya UC na kuchunguza utaratibu wake wa utendaji.BLG ni fomula inayojulikana ya mitishamba ya Kichina inayotumika kutibu mafua.8,33 Kazi katika maabara yetu na zingine imeonyesha kuwa indigo, bidhaa ya dawa za jadi za Kichina iliyosindikwa kutoka kwa malighafi sawa na BLG, inaonyesha ufanisi mkubwa katika matibabu ya UC kwa wanadamu na wanyama.4,34 Hata hivyo, athari za BLG dhidi ya ugonjwa wa kolitis na athari zake Utaratibu haueleweki. Katika utafiti wa sasa, matokeo yetu yanaonyesha kuwa BLG hupunguza kwa ufanisi uvimbe wa utumbo unaosababishwa na DSS, ambao unahusishwa na urekebishaji wa utumbo. microbiota na urejesho wa uzalishaji wa GLP-1 unaotokana na utumbo.
Inajulikana sana kwamba UC ina sifa ya vipindi vya kurudiarudia vyenye sifa za kawaida za kimatibabu, kama vile kupunguza uzito, kuhara, kutokwa na damu kwenye rektamu, na uharibifu mkubwa wa utando wa utumbo mpana.35 Kwa hivyo, ugonjwa sugu wa kolitis unaorudiarudia ulitolewa kwa kutoa mizunguko mitatu ya 1.8% DSS kwa siku tano, ikifuatiwa na siku saba za kunywa maji. Kama inavyoonyeshwa kwenye Mchoro 1B, kupungua kwa uzito na alama za DAI zilionyesha kuanzishwa kwa mafanikio kwa ugonjwa sugu wa kolitis unaorudiarudia. Panya katika kundi lililotibiwa na BLG walionyesha kupona kwa kasi kutoka siku ya 8, ambayo ilikuwa tofauti sana na siku ya 24. Mabadiliko hayo hayo pia yalionekana katika alama ya DAI, ikionyesha uboreshaji katika uboreshaji wa kimatibabu wa ugonjwa wa kolitis. Kwa upande wa jeraha la utumbo mpana na hali ya uchochezi, urefu wa utumbo mpana, uharibifu wa tishu za utumbo mpana, na usemi wa jeni na uzalishaji wa saitokini zinazosababisha uchochezi TNF-α, IL-1β, na IL-6 katika tishu za utumbo mpana pia ziliboreshwa sana baada ya matibabu ya BLG. Kwa pamoja, matokeo haya yanaonyesha wazi kuwa BLG inafaa katika matibabu ya ugonjwa sugu wa kolitis unaorudiarudia kwa panya.
BLG ina athari zake za kifamasia vipi? Uchunguzi mwingi uliopita umeonyesha kuwa microbiota ya utumbo ina jukumu muhimu katika pathogenesis ya UC, na matibabu yanayotegemea microbiome na yanayolenga microbiome yameibuka kama mkakati wa kuvutia sana kwa matibabu ya UC. Katika utafiti huu, tulionyesha kuwa matibabu ya BLG yalisababisha mabadiliko makubwa katika muundo wa microbiota ya utumbo, ikidokeza kwamba athari ya kinga ya BLG dhidi ya ugonjwa wa kolitis unaosababishwa na DSS inahusiana na urekebishaji wa microbiota ya utumbo. Uchunguzi huu unaendana na wazo kwamba kupanga upya homeostasis ya microbiota ya utumbo ni mbinu muhimu ya kuelewa ufanisi wa maandalizi ya TCM.36,37 Ikumbukwe kwamba Akkermansia ni bakteria hasi ya Gram-hasi na isiyo na aerobic kabisa ambayo huishi kwenye safu ya kamasi ya utumbo, ambayo huharibu mucins, hutoa asidi ya propionic, huchochea utofautishaji wa seli za goblet, na hudumisha utando wa mucous. kazi ya uadilifu wa kizuizi.26 Data nyingi za kliniki na wanyama zinaonyesha kwamba Akkermansia inahusishwa sana na utando mzuri wa mucous,38 na ulaji wa mdomo wa Akkermansia spp. inaweza kuboresha kwa kiasi kikubwa uvimbe wa utando wa mucous.39 Data yetu ya sasa inaonyesha kwamba wingi wa Akkermansia huongezeka kwa kiasi kikubwa baada ya matibabu ya BLG. Zaidi ya hayo, Prevotellaceae_UCG-001 ni bakteria inayozalisha SCFA.27 Tafiti nyingi zilionyesha kuwa Prevotellaceae_UCG-001 ilipatikana kwa wingi mdogo katika kinyesi cha wanyama wenye ugonjwa wa kolitis.40,41 Data yetu ya sasa pia inaonyesha kwamba matibabu ya BLG yanaweza kuongeza kwa kiasi kikubwa wingi wa Prevotellaceae_UCG-001 katika utumbo mpana wa panya waliotibiwa na DSS. Kwa upande mwingine, Oscillibacter ni bakteria ya mesophilic, isiyo na aerobic kabisa.42 iliripoti kwamba wingi wa Oscillibacter uliongezeka kwa kiasi kikubwa katika panya wa UC na ulihusiana kwa kiasi kikubwa na viwango vya IL-6 na IL-1β na alama za patholojia.43,44 Ikumbukwe kwamba matibabu ya BLG yalipunguza kwa kiasi kikubwa wingi wa Oscillibacter katika kinyesi cha panya waliotibiwa na DSS. Ikumbukwe kwamba bakteria hawa waliobadilishwa na BLG walikuwa ndio wanaozalisha zaidi SCFA. bakteria. Tafiti nyingi za awali zimeonyesha athari za manufaa za SCFA kwenye uvimbe wa utumbo mpana na ulinzi wa uadilifu wa epithelial ya utumbo mpana.45,46 Data yetu ya sasa pia ilibaini kuwa viwango vya SCFA acetate, propionate, na butyrate katika kinyesi kilichotibiwa na DSS viliongezeka sana katika panya waliotibiwa na BLG. Kwa pamoja, matokeo haya yanaonyesha wazi kwamba matibabu ya BLG yanaweza kuboresha kwa ufanisi bakteria zinazozalisha SCFA zinazosababishwa na DSS katika panya walio na ugonjwa sugu wa kolitis unaorudiarudia.
GLP-1 ni incretin inayozalishwa zaidi kwenye ileamu na utumbo mpana na ina jukumu muhimu katika kuchelewesha uondoaji wa chakula tumboni na kupunguza glukosi kwenye damu baada ya kula.47 Ushahidi unaonyesha kwamba dipeptidyl peptidase (DPP)-4, agonisti ya kipokezi cha GLP-1, na nanomedicine ya GLP-1 inaweza kupunguza uvimbe wa utumbo kwa ufanisi kwa panya.48-51 Kama ilivyoripotiwa katika tafiti zilizopita, viwango vya juu vya SCFA vilihusishwa na viwango vya GLP-1 kwenye plasma kwa wanadamu na panya. 52 Data yetu ya sasa inaonyesha kwamba baada ya matibabu ya BLG, viwango vya GLP-1 kwenye seramu na usemi wa mRNA ya Gcg viliongezeka kwa kiasi kikubwa. Vile vile, usiri wa GLP-1 uliongezeka kwa kiasi kikubwa katika tamaduni za utumbo mpana kufuatia kuchochewa na dondoo za kinyesi kutoka kwa panya wa ugonjwa wa kolitis waliotibiwa na BLG ikilinganishwa na kuchochewa na dondoo za kinyesi kutoka kwa panya wa ugonjwa wa kolitis waliotibiwa na DSS. Je, SCFA zinaathirije kutolewa kwa GLP-1?Gwen Tolhurst et al. Imeripoti kwamba SCFA inaweza kuchochea usiri wa GLP-1 kupitia GRP43 na GPR41.29 Data yetu ya sasa pia inaonyesha kwamba matibabu ya BLG huongeza kwa kiasi kikubwa usemi wa mRNA wa GRP43 na GPR41 katika utumbo mpana wa panya waliotibiwa na DSS. Data hizi zinaonyesha kwamba matibabu ya BLG yanaweza kurejesha uzalishaji wa GLP-1 unaokuzwa na SCFA kwa kuamilisha GRP43 na GPR41.
BLG ni dawa ya muda mrefu isiyouzwa kwa daktari (OTC) nchini China. Kiwango cha juu zaidi kinachovumiliwa cha BLG katika panya wa Kunming ni 80g/Kg, na hakuna sumu kali iliyoonekana.53 Hivi sasa, kipimo kilichopendekezwa cha BLG (bila sukari) kwa wanadamu ni 9-15 g/siku (mara 3 kwa siku). Utafiti wetu ulionyesha kuwa BLG katika 1g/Kg iliboresha ugonjwa sugu wa kolitis unaosababishwa na DSS kwa panya. Kipimo hiki ni karibu na kipimo cha BLG kinachotumika kliniki. Utafiti wetu pia uligundua kuwa utaratibu wake wa utendaji unasababishwa, angalau kwa sehemu, na mabadiliko katika microbiota ya utumbo, haswa bakteria zinazozalisha SCFA, kama vile Akkermansia na Prevotellaceae_UCG-001, ili kurejesha uzalishaji wa GLP-1 inayotokana na utumbo. Matokeo haya yanaonyesha kuwa BLG inastahili kuzingatiwa zaidi kama wakala anayeweza kutibu ugonjwa wa kolitis ya kliniki. Hata hivyo, utaratibu halisi ambao hurekebisha microbiota ya utumbo bado haujathibitishwa na panya walio na upungufu wa microbiota na upandikizaji wa bakteria ya kinyesi.
Asidi, asidi asetiki; lakini, asidi butiriki; BLG, pandan; DSS, dextran sodiamu sulfate; DAI, kiashiria cha shughuli za ugonjwa; DPP, dipeptidyl peptidase; FID, kigunduzi cha ioni ya moto; F-Con, udhibiti wa dondoo za kinyesi za panya; F-DSS, dondoo za kinyesi za panya wa kolitis ya DSS; F-BLG, dondoo za kinyesi za panya wa kolitis waliotibiwa na BLG; GLP-1, peptidi-kama glukagoni-1; Gcg, glukagoni; kromatografia ya gesi, kromatografia ya gesi; GRP43, kipokezi kilichounganishwa na protini ya G 43; GRP41, kipokezi kilichounganishwa na protini ya G 41; H&E, hematoxylin-eosin; HBSS, Suluhisho la Chumvi Lililosawazishwa la Hanks; OTC, OTC; PCA, uchambuzi wa vipengele vikuu; PCoA, uchambuzi mkuu wa uratibu; Pro, asidi ya propionic; SASP, sulfasalazine; SCFA, asidi ya mafuta ya mnyororo mfupi; Dawa ya Kichina, dawa ya jadi ya Kichina; UC, ugonjwa wa kolitis ya kidonda.
Itifaki zote za majaribio ziliidhinishwa na Kamati ya Maadili ya Wanyama ya Chuo Kikuu cha Peking Shenzhen-Hong Kong Chuo Kikuu cha Sayansi na Teknolojia (Shenzhen, China) kulingana na Miongozo ya Taasisi na Kanuni za Wanyama (nambari ya maadili A2020157).
Waandishi wote walitoa michango muhimu katika dhana na muundo, upatikanaji wa data, au uchambuzi na tafsiri ya data; walishiriki katika kuandaa makala au kurekebisha kwa kina maudhui muhimu ya kiakili; walikubali kuwasilisha hati hiyo kwa jarida la sasa; hatimaye waliidhinisha toleo hilo kwa ajili ya kuchapishwa; Waliowajibika kwa vipengele vyote vya kazi.
Kazi hii iliungwa mkono na Wakfu wa Kitaifa wa Sayansi Asilia wa China (81560676 na 81660479), mradi wa daraja la kwanza wa Chuo Kikuu cha Shenzhen (86000000210), Mfuko wa Kamati ya Ubunifu wa Sayansi na Teknolojia ya Shenzhen (JCYJ20210324093810026), na Mfuko wa Utafiti wa Sayansi na Teknolojia ya Tiba wa Mkoa wa Guangdong (A2020157 na A2020272), Famasia ya Chuo Kikuu cha Tiba cha Guizhou Mkoa wa Guizhou Unaofadhiliwa na Maabara Muhimu (YWZJ2020-01) na Hospitali ya Shenzhen ya Chuo Kikuu cha Peking (JCYJ2018009).
1. Tang B, Zhu J, Zhang B, et al. Uwezo wa matibabu wa triptolide kama wakala wa kuzuia uchochezi katika ugonjwa wa kolitisi wa majaribio unaosababishwa na dextran sodiamu sulfate katika mice.pre-immune.2020;11:592084.doi: 10.3389/fimmu.2020.592084
2. Kaplan GG. Mzigo wa kimataifa wa IBD: kuanzia 2015 hadi 2025. Nat Rev Gastroenterol Hepatol.2015;12:720–727.doi: 10.1038/nrgastro.2015.150
3. Peng J, Zheng TT, Li Xue, et al. Alkaloidi zinazotokana na mimea: virekebishaji vya magonjwa vinavyoahidi katika ugonjwa wa utumbo wa uchochezi.Prepharmacology.2019;10:351.doi:10.3389/fphar.2019.00351
4. Xiao Haiteng, Peng Jie, Wen B, et al.Indigo Naturalis huzuia msongo wa oksidi wa utumbo mpana na majibu ya Th1/Th17 katika ugonjwa wa kolitis unaosababishwa na DSS kwa panya. Oxid Med Cell Longev.2019;2019:9480945.doi: 10.1155/2019/9480945
5. Chen M, Ding Y, Tong Z. Ufanisi na usalama wa Sophora flavescens (Sophora flavescens) Dawa ya mitishamba ya Kichina katika matibabu ya ugonjwa wa kolitis ya vidonda: ushahidi wa kimatibabu na utaratibu unaowezekana.Prepharmacology.2020;11:603476.doi:10.3389/fphar.2020.603476
6. Cao Fang, Liu Jie, Sha Benxing, Pan HF. Bidhaa asilia: dawa zenye ufanisi wa majaribio kwa ajili ya matibabu ya ugonjwa wa utumbo wa uchochezi. Curr Pharmaceuticals.2019;25:4893–4913.doi: 10.2174/1381612825666191216154224
7. Zhang C, Jiang M, Lu A. Tafakari kuhusu matibabu ya ziada ya ugonjwa wa kolitis ya vidonda kwa kutumia dawa za jadi za Kichina. Chanjo ya Mzio ya Kliniki.2013;44:274–283.doi: 10.1007/s12016-012-8328-9
8. Li Zhongteng, Li Li, Chen TT, et al. Ufanisi na usalama wa chembechembe za Banlangen katika matibabu ya mafua ya msimu: itifaki ya utafiti kwa jaribio lililodhibitiwa bila mpangilio.trial.2015;16:126.doi: 10.1186/s13063-015-0645-x